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      產(chǎn)品介紹:

      XL10-Gold Chemically Competent Cell

      發(fā)布時(shí)間: :2020-08-24 20:51 瀏覽次數(shù): :
      產(chǎn)品介紹:
      產(chǎn)品規(guī)格: 產(chǎn)品品牌:
      參考價(jià)格::
      詳細(xì)說明:

       XL10-Gold Chemically Competent Cell 使用說明書

      產(chǎn)品說明:

      XL10-Gold是目前轉(zhuǎn)化效率最高的感受態(tài)細(xì)胞,由Stratagene開發(fā)的特異性用于大質(zhì)粒或珍貴連接產(chǎn)物轉(zhuǎn)化或構(gòu)建文庫(kù)的超級(jí)感受態(tài)細(xì)胞。XL10-Gold菌株為Hte(high transformation efficiency)基因型,HteStratagene開發(fā)的特異性提高感受態(tài)轉(zhuǎn)化效率及大質(zhì)粒轉(zhuǎn)化能力的宿主菌基因型,已成功應(yīng)用于40kd質(zhì)粒的構(gòu)建。[Δ(mcrA)183 Δ(mcrCB-hsdSMR-mrr)173]賦予XL10-Gold缺失幾乎所有已知的限制酶切系統(tǒng);同時(shí)缺失核酸內(nèi)切酶(endA),提高了質(zhì)粒DNA的產(chǎn)量和質(zhì)量;重組酶缺陷型(recA)減少插入片段的同源重組概率,保證了插入DNA的穩(wěn)定性;TetR, CamR賦予菌株四環(huán)素和氯霉素抗性;lacIqZΔM15的存在使XL10-Gold可用于藍(lán)、白斑篩選。XL10-Gold感受態(tài)細(xì)胞經(jīng)特殊工藝制作,pUC19質(zhì)粒檢測(cè)轉(zhuǎn)化效率>2×109 cfu/μg。

      產(chǎn)品組成:

        

       

       

       XL10-Gold Chemically Competent Cell

      10 × 100 µL

      50× 100 µL

      pUC19control vector,10pg/μL

      10μL

      10μL

       

       

       

      * 基因型:TetΔ(mcrA)183 Δ(mcrCB-hsdSMR-mrr)173 endA1 supE44 thi-1 recA1 gyrA96 relA1 lac Hte [F? proAB lacIqZΔM15 Tn10 (TetR) Amy CamR]

       

      儲(chǔ)存條件:

      -80℃±10℃保存6個(gè)月。請(qǐng)勿將本品置于-20℃或液氮中保存。

       

      使用方法:

      1.       將感受態(tài)細(xì)胞從-80℃冰箱中取出,置于冰水浴中融化。

      2.       將目的DNA(質(zhì)粒或連接產(chǎn)物)加入到100μL感受態(tài)細(xì)胞中,輕輕彈勻,冰上孵育30分鐘。

      3.       42℃水浴熱激35秒(非常重要——Efficiency decreases sharply when cells are heat-pulsed for <30 seconds or for >40 seconds.),立刻置于冰上,靜置23分鐘,晃動(dòng)會(huì)降低轉(zhuǎn)化效率。

      4.       向離心管中加入200μL無抗LB、TBSOC培養(yǎng)基,混勻后于220rpm,37℃搖床振蕩復(fù)蘇60分鐘,使轉(zhuǎn)化物表達(dá)抗性基因。

       

      5.       根據(jù)實(shí)驗(yàn)要求吸取適量菌液,涂布至相應(yīng)抗生素的2YTLB培養(yǎng)基上,室溫正置10分鐘,待菌液被平板充分吸收后,37℃倒置過夜培養(yǎng)。

       

      北京畢特博生物技術(shù)有限責(zé)任公司

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